实验室进行农药残留检测的基本流程
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现阶段,农药残留检测仪的使用已经相当广泛,成为蔬菜水果茶叶农药残留检测的“主力军”。下面来介绍一下实验室进行农药残留检测的基本流程。
检测依据:《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测》(GB/T5009.199-2003)
试剂组成及保存:
1、缓冲液:取缓冲溶液试剂1袋倒入试剂瓶中,加蒸馏水(或纯净水)至500mL刻度线,溶解搅拌均匀
2、显色剂:向标有“显色剂”的试剂瓶中加入12.5mL的缓冲溶液,溶解,混匀即可。
3、底物:向标有“底物”的试剂瓶中加入12.5mL蒸馏水,溶解、混匀即可,50微升/次。4、酶试剂:敲开玻璃试剂瓶将酶液倒入备用的白色空瓶内,直接使用。
样品制备流程:
1、擦去果蔬样品表面泥土,称取1g果蔬样品(叶菜剪成宽度1厘米左右的菜样,块根菜取横截面样品)放入烧杯或提取瓶中,加入5mL缓冲溶液,振摇2分钟。
2、若浸提液澄清无色或颜色较浅,可直接作为待测样液;若浸提液浑浊,则需要过滤,滤液作为待测样液。
3、若浸提液色素干扰,可对样品进行整株提取。
4、擦去果蔬样品表面泥土,称取1g果蔬样品(叶菜剪成宽度1厘米左右的菜样,块根菜取横截面样品)放入烧杯或提取瓶中,加入5mL缓冲溶液,振摇,静置2分钟。将提取液全部倒入另一支10ml离心管,加入2滴试剂A,摇匀沸水浴5min后,取出冷却,迷你离心机(6000转/min)离心2min,取2.5ml澄清液,按照样品测定进行检测。
样品测定过程:
对照液测试:对照液测试:取缓冲液2.5mL,酶试剂50微升,显色剂50微升至5ml离心管中,室温放置10分钟或37℃水浴5min,然后加入50微升底物,摇匀后立即转移到比色皿中,及时放入仪器比色池第一通道中。(每次开机,对照溶液检测只需进行一次即可,且必须放入1通道。)
样品溶液测试:取待测样品液2.5mL,酶试剂50微升,显色剂50微升至5ml离心管中,室温放置10分钟或37℃水浴5min,然后加入50微升底物,摇匀后立即转移到比色皿中,及时放入仪器比色池中
结果判定标准:
根据GB/T5009.199-2003要求,抑制率大于50%时检测结果为阳性,小于50%为阴性,对于阳性样品要有2次以上重复检测。
检测依据:《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测》(GB/T5009.199-2003)
试剂组成及保存:
1、缓冲液:取缓冲溶液试剂1袋倒入试剂瓶中,加蒸馏水(或纯净水)至500mL刻度线,溶解搅拌均匀
2、显色剂:向标有“显色剂”的试剂瓶中加入12.5mL的缓冲溶液,溶解,混匀即可。
3、底物:向标有“底物”的试剂瓶中加入12.5mL蒸馏水,溶解、混匀即可,50微升/次。4、酶试剂:敲开玻璃试剂瓶将酶液倒入备用的白色空瓶内,直接使用。
样品制备流程:
1、擦去果蔬样品表面泥土,称取1g果蔬样品(叶菜剪成宽度1厘米左右的菜样,块根菜取横截面样品)放入烧杯或提取瓶中,加入5mL缓冲溶液,振摇2分钟。
2、若浸提液澄清无色或颜色较浅,可直接作为待测样液;若浸提液浑浊,则需要过滤,滤液作为待测样液。
3、若浸提液色素干扰,可对样品进行整株提取。
4、擦去果蔬样品表面泥土,称取1g果蔬样品(叶菜剪成宽度1厘米左右的菜样,块根菜取横截面样品)放入烧杯或提取瓶中,加入5mL缓冲溶液,振摇,静置2分钟。将提取液全部倒入另一支10ml离心管,加入2滴试剂A,摇匀沸水浴5min后,取出冷却,迷你离心机(6000转/min)离心2min,取2.5ml澄清液,按照样品测定进行检测。
样品测定过程:
对照液测试:对照液测试:取缓冲液2.5mL,酶试剂50微升,显色剂50微升至5ml离心管中,室温放置10分钟或37℃水浴5min,然后加入50微升底物,摇匀后立即转移到比色皿中,及时放入仪器比色池第一通道中。(每次开机,对照溶液检测只需进行一次即可,且必须放入1通道。)
样品溶液测试:取待测样品液2.5mL,酶试剂50微升,显色剂50微升至5ml离心管中,室温放置10分钟或37℃水浴5min,然后加入50微升底物,摇匀后立即转移到比色皿中,及时放入仪器比色池中
结果判定标准:
根据GB/T5009.199-2003要求,抑制率大于50%时检测结果为阳性,小于50%为阴性,对于阳性样品要有2次以上重复检测。
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